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IBL百日咳桿菌IgM檢測(cè)試劑

簡(jiǎn)要描述:

百日咳桿菌毒素 IgM ELISA:酶聯(lián)法定性及定量測(cè)定人血清或血漿中百日咳博德特氏菌(Bordetella pertussis)毒素(PT) IgG 抗體水平?;趭A心法固相酶聯(lián)吸附檢測(cè)(ELISA)原理。微孔板空中包被抗原,樣品中含有針對(duì)抗原特異結(jié)合抗體(人IgG)則可以通過(guò)二次酶聯(lián)抗體(E-Ab)檢測(cè)到,加入顯色底物,酶解反應(yīng)顯色,顏色深淺與檢測(cè)吸附的 IgG 水平成正比,以此通過(guò)顏色判斷。

更新時(shí)間:2025-01-03

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IBL百日咳桿菌IgM檢測(cè)試劑
 

1. 用途

酶聯(lián)法定性及定量測(cè)定人血清/血漿中百日咳桿菌毒素(PT) IgG 抗體水平。

2. 摘要

百日咳是一種由百日咳博德特氏菌(Bordetella pertussis)引起的呼吸道疾病,可以通過(guò)空氣傳播傳播。 革蘭氏陰性桿菌會(huì)產(chǎn)生一系列生物活性分子,這些化合物或在致病或在針對(duì)百日咳的免疫過(guò)程中出現(xiàn),并表現(xiàn)出不同的影響。其中百日咳毒素(pt)、絲狀血細(xì)胞凝集素(fha)和不同脂多糖(lps)等已進(jìn)行了表征研究。

百日咳顯示高傳播率(未接種疫苗的家庭成員的感染率超過(guò) 90%)并且可導(dǎo)致嚴(yán)重疾病,特別是對(duì)于幼兒。1980 年至 1989 年一年內(nèi)的 10749 名患者中,69%被送入醫(yī)院,22%患有肺炎,0.9%患有腦病,0.6%死于肺炎。對(duì)于年齡較大的兒童和成人包括已接種疫苗的人也通過(guò)不明顯支氣管炎或上呼吸道發(fā)炎觀察到感染。無(wú)癥狀的病例也很常見(jiàn)。

百日咳疾病或百日咳疫苗免疫后的血清學(xué)反應(yīng)采用凝集試驗(yàn)、沉淀素,補(bǔ)體結(jié)合和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA) 測(cè)定。 對(duì)于 ELISA 測(cè)定,博德特氏菌抗原(包括毒素,FHA 和 LPS, U/ml)與固相支持物結(jié)合,方法靈敏、易于操作,測(cè)定單一血清的血清陽(yáng)性并通過(guò)測(cè)定IgM 和 IgA 來(lái)判斷近博德特氏菌感染情況。

與其他博德特氏菌屬蛋白相比,百日咳毒素(PT)具有高度特異性。 PT 也是眾多疫苗的組成部分。

3. 檢測(cè)原理

基于夾心法固相酶聯(lián)吸附檢測(cè)(ELISA)原理。微孔板空中包被抗原,樣品中含有針對(duì)抗原特異結(jié)合抗體(人IgG)則可以通過(guò)二次酶聯(lián)抗體(E-Ab)檢測(cè)到,加入顯色底物,酶解反應(yīng)顯色,顏色深淺與檢測(cè)吸附的 IgG 水平成正比,以此通過(guò)顏色判斷樣品中IgG 的存在,并通過(guò)標(biāo)曲定量測(cè)定IgG 的濃度水平。

4. 注意事項(xiàng)

1. 僅供研究專(zhuān)業(yè)用途使用。

2. 檢測(cè)前,完整仔細(xì)閱讀隨試劑盒內(nèi)附的有效版本說(shuō)明書(shū),確保充分理解全部?jī)?nèi)容。

3. 若試劑盒包裝破損,請(qǐng)于收到試劑盒一周內(nèi)書(shū)面聯(lián)系 IBL 或供貨商。不要使用破損的試劑進(jìn)行檢測(cè)。

4. 采用同批次同效期試劑進(jìn)行檢測(cè),不同批次的試劑不得混用。不要使用過(guò)期試劑。

5. 遵守良好實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范及安全指南,必要時(shí)穿戴實(shí)驗(yàn)服、一次性乳膠手套及護(hù)目鏡。

6. 試劑盒中有害成分接觸后可能刺激眼睛和皮膚。詳情見(jiàn)盒內(nèi)材料MATERIALS SUPPLIED 及標(biāo)簽。另外,IBL 網(wǎng)上也提供了產(chǎn)品相關(guān)《Material Safety Data Sheets》供下載,或直接尋求 IBL 索取。

7. 化學(xué)品及制備或使用過(guò)的試劑必須當(dāng)作有害廢物依照國(guó)家生物有害及安全指南或法規(guī)進(jìn)行處理。

8. 清潔人員在處理潛在有害物品時(shí)應(yīng)有專(zhuān)業(yè)人士指導(dǎo)。

9. 避免接觸終止液,否則可能引起皮膚過(guò)敏及灼傷。

10. 部分試劑含疊氮鈉(NaN3防腐劑。若接觸眼睛或皮膚,立即用水沖洗。NaN3 可與鉛和銅管發(fā)生反應(yīng)形成具有爆炸性的疊氮金屬物。因此,處理試劑時(shí),要用大量水沖洗避免疊氮物質(zhì)的積累。

11. 試劑盒中含有人血清或血漿的試劑均經(jīng)過(guò)檢測(cè),顯示抗 HIV I/II、HBsAg 及 抗 HCV 均為陰性。盡管如此, 但不能排除這些及其他傳染因子的存在,因此使用及處理時(shí),應(yīng)按潛在生物有害物處理。

5. 保存及穩(wěn)定性

試劑盒常溫條件運(yùn)輸,保存應(yīng)在 2-8 °C。遠(yuǎn)離熱源或陽(yáng)光照射。樣本及制備試劑的保存與穩(wěn)定性在后面相應(yīng)章節(jié)有述。

未開(kāi)封的試劑在注明的效期內(nèi)穩(wěn)定。試劑盒初次開(kāi)封后,微孔板裝在密封袋密封及試劑瓶蓋緊放在 2-8 °以穩(wěn)定保存 個(gè)月。

6. 樣品采集與保存

血清、血漿 (EDTA, 肝素處理)

遵照常規(guī)靜脈采血注意事項(xiàng)。從采血開(kāi)始直至檢測(cè)時(shí)段保持血樣化學(xué)屬性完整性是十分重要的。檢測(cè)時(shí)避免采用發(fā)生重度溶血、黃疸或嚴(yán)重脂血癥的樣品。外觀渾濁的樣品檢測(cè)前要進(jìn)行離心去除顆粒物。

保存:

2-8 °C

-20 °C

遠(yuǎn)離熱源和日光照射 

穩(wěn)定性:

> 7 

避免反復(fù)凍融

7. 試劑盒內(nèi)提供的物品

 

數(shù)量

標(biāo)識(shí)

組分

1 x 12 x 8

MTP

微孔板

 

可拆卸板條,包被有特定抗原。

 

 

1 x 15 mL

 

ENZCONJ IgG

酶聯(lián) IgG

 

紅色瓶蓋,即用試劑。內(nèi)含:抗人 IgG 且偶聯(lián)過(guò)氧化物酶的抗體

含蛋白的緩沖液, 0.01 %甲基異噻唑啉酮, 0.01 % 溴硝基二噁烷

及 5 mg/L ProClin

 

 

 

1 x 4 x 2 mL

 

CAL A-D

 

標(biāo)準(zhǔn)品 A-D

 

0; 25; 50; 150 IU/mL. 即用試劑。

 

標(biāo)準(zhǔn)品 A = 陰性對(duì)照

標(biāo)準(zhǔn)品 B = 閾值判斷對(duì)照

標(biāo)準(zhǔn)品 C = 弱陽(yáng)性對(duì)照

標(biāo)準(zhǔn)品 D = 陽(yáng)性對(duì)照

標(biāo)準(zhǔn)品按單位 (IU) WHO 標(biāo)準(zhǔn) 06/140 進(jìn)行過(guò)校正

內(nèi)含: 抗百日咳毒素(PT)的 IgG 抗體及 PBS 稀釋過(guò)的人血清、

0.01 %甲基異噻唑啉酮及 0.01 %溴硝基二噁烷。

1 x 60 mL

DILBUF

稀釋緩沖液

 

即用試劑。內(nèi)含: PBS 緩沖液、BSA, < 0.1 % NaN3

1 x 60 mL

WASHBUF

 

CONC

濃縮洗液 (10x)

 

內(nèi)含: PBS 沖液、吐溫 20。

 

1 x 15 mL

TMB SUBS

TMB 底物液

 

即用試劑,內(nèi)含四甲基聯(lián)苯胺(TMB)。

1 x 15 mL

TMB STOP

TMB 終止液

 

即用試劑, 0.5 M H2SO4.

 

2 x

FOIL

粘性鋁箔

 

供孵育時(shí)蓋住微孔板使用。

 

1 x

BAG

塑料袋

 

密封袋,用于未使用板條的干燥保存。

8. 需要但未提供的實(shí)驗(yàn)材料

1. 微量移液器 (Eppendorf 多通道移液器或類(lèi)似產(chǎn)品, < 3% CV),量程: 5、 50、100、500 µL

2. 校正過(guò)的檢測(cè)裝置

3. 用于樣品稀釋的管子 (1 mL)

4. 8 通道微量移液器,及試劑儲(chǔ)槽

5. 洗瓶、自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)

6. 酶標(biāo)儀,可以讀取 450 nm (校正波長(zhǎng) 600-650 nm的吸光值

7. 雙蒸水或去離子水

8. 吸水紙巾、移液槍頭、計(jì)時(shí)器

 

9. 操作注意事項(xiàng)

1. 任何不當(dāng)處理樣品或修改測(cè)試程序都可能影響結(jié)果。 要求的移液量、孵育時(shí)間、溫度和預(yù)處理步驟必須嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。 僅使用經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)的移液器和檢測(cè)設(shè)備。

2. 測(cè)試開(kāi)始后,所有步驟都應(yīng)該不間斷地完成。 確保在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間準(zhǔn)備好所需的試劑、材料和設(shè)備。 允許所有試劑和樣品達(dá)到室溫18-25oC,并在使用前輕輕旋轉(zhuǎn)每瓶液體試劑和樣品。 混合試劑不要起泡。

3. 避免污染試劑,移液器和孔/管。 為每個(gè)組份和樣品移取時(shí)使用新的一次性塑料移液器吸頭。 瓶蓋不要互換。未使用的試劑瓶要始終蓋上。 不要使用用過(guò)的板孔/試管或試劑。

4. 使用移液方案驗(yàn)證合適的板布局。

 

IBL百日咳桿菌IgM檢測(cè)試劑

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